Piše: Ekrem Karahodžić
PREPOZNAVANJE NOZEMOZE
Pojavu nozemoze u zajednici i njen početni razvoj ne obilježavaju karakteristični simptomi (znakovi, obilježja) na osnovu kojih bi pčelar, na samom početku nastajanja, mogao uočiti pojavu bolesti. Nozemoza se može uočiti tokom trajanja, i to kada uslijed nje posljedično pođu umirati pčelinje jedinke u većem broju. Za to vrijeme se bolest u zajednici širi.
U pojedinim životnim periodima pčelinjih zajednica različita je zastupljenost oboljelih pčelinjih jedinki, a pored toga različiti su i simptomi (znakovi) bolesti u staništu i van staništa, na pčelinjoj jedinki i zajednici, a uz to svi ti pojedinačni znakovi nisu karakteristični samo za nozemozu. Od oblika bolesti zavisi zastupljenost zdravih, oboljelih i mrtvih pčelinjih jedinki u zajednici. Ova zastupljenost različita je u različitim životnim periodima pčelinje zajednice a narocito se razliito manifestuje u zimskih i ljetnih pčela.
U različitim životnim periodima pčelinje zajednice različita je učestalost prirodnog odumiranja pčelinjih jedinki, naročito njihovog umiranja u staništu. Najveća zastupljenost oboljelih jedinki u oboljeloj zajednici je u periodu prirodnog odumiranja zimskih pčela ali i u periodu intenzivnog razvoja pčelinje zajednice. U većem dijelu perioda prezimljavanja radilice umiru u zajednici, a najprije umiru nozemozne, kada je njihova zastupljenost u staništu među mrtvim pčelama i najveća. Tokom aktivnog rada pčela samo teško oboljele pčele umiru u svom staništu.
U različitim životnim periodima zejednice različita je starosna struktura pčela u zajednici, kao i zastupljenost oboljelih jedinkih u njoj. Ciljanim odabirom pčelinjih jedinki u pripremanju uzorka za dijagnosticiranje bolesti može se veoma utjecati na objektivnost laboratorijskog nalaza.
Znakovi nozemoze na pčelinjoj jedinki
Oboljele pčele radilice žive polovinu života zdravih pčela. Slabo su aktivne, naročito na poslovima ishrane larvi i matice, pa se prijevremeno posvećuju drugim aktivnostima. U poslovima sabiranja i preuzimanja hrane one su slabo aktivne, neefikasne su i neproduktivne. One osjećaju stalnu glad pa uzimaju sve više hrane. Oboljeli želudac ne može probaviti najveći dio uzete hrane pa ona neprobavljiva dospijeva u debelo crijevo, a organizmu pčele je nedostatna. Neprobavljena hrana abnormalno opterećuje debelo crijevo. Ona u njega sve češće dospijeva u sve većim i većim količinama pa su potrebe za njegovim pražnjenjem jake i učestale. Jedna oboljela jedinka potroši mnogostruko više hrane od zdrave. Ona praktično iznosi hranu iz svog staništa. Zastupljenost oboljelih pčela na ramovima sa hranom nesrazmjerno je veća nego na ramovima otvorenog legla.
Posmatranjem i pregledanjem bolesne pčele i poređenjem sa zdravom mogu se uočiti njihove različitosti. Kod bolesne pčele oblik zatka (trbuha, abdomena) je tubast. I kod stare zdrave pčele zadak trbuha je tubast, ali su njena zadnja tri trbušna segmenta (tegtira) sabranija u sedmom segmentu nego kod bolesne pčele. Kod bolesne pčele, membrana između šestog i sedmog trbušnog segmenta je rastegnuta, pa se uočava razdijeljenost ova dva segmenta, a što se kod zdrave radilice ne može uočiti. Kod oboljelih mlađih radilica (kućnih pčela) trbuh je više naduvan, zadak tupast, ali manje nego u bolesnih starijih pčela. Bolesna pčela, isprovocirana na ubod, u napadnuto mjesto relativno sporo prodire bodeže svoje žaoke. Odmah, po prvoj reakciji uboda, bolesna pčela se može odstraniti zajedno sa žaokom. Kod uboda zdrave pčele to nije moguće, jer njeni bodeži trenutačno duboko prodru u napadnuto mjesto gdje žaoka, muskulaturom napadnutog mjesta, biva ukliještena pa se kida (čupa) iz trbuha pčele. Zajedno sa žaokom iz trbuha se povlače oštećeni i drugi trbušni organi. Kada bolesnu radilicu isprovociramo na ubod pa je lagano odvojimo od napadnutog mjesta ona izvuče bodeže žaoke iz napadnutog mjesta, tako da se žaočni aparat iz njenog zatka rijetko kada potpuno iščupa već se samo istegne.
Posmatrajući srednje crijevo bolesne pčele uočljivo je veliko proširenje njegovog srednjeg dijela. Boja njegovih stijenki je mliječno bijela. Kod zdravih pčela srednje crijevo je jednake debljine po cijeloj dužini, a boja stijenki je tamnocrvena. Sama boja sadržaja srednjeg i zadnjeg crijeva ne ukazuje na bolesno stanje pčele. Veoma često neosnovano se prezentuje da je tamnocrvena boja (boja zrele višnje) izmeta (fecesa) pčele karakteristična za nozemozu. Na pigmentaciju sadržaja srednjeg i zadnjeg crijeva pčele utječu sasvim drugi faktori, što znači da boja izmeta nije karakterističan znak nozemoze. Gustoća sadržaja zadnjeg crijeva može ali i ne mora ukazivati na bolest. Kod bolesne pčele izmet je u pravilu rijedak, ali rijedak izmet ili dizenteriju mogu uzrokovati i drugi faktori, kao na primjer neadekvatna hrana pčela.
Znakovi nozemoze u staništu
Oboljela pčelinja zajednica u proljeće zaostaje u svom razvoju. U njoj je u proljeće i jesen uočljivo da ima nesrazmjerno veću količinu legla u odnosu na broj pčela, odnosno njenu jačinu. Ljeti se ova karakteristična pojava, kao i drugi znakovi teže uočavaju. Početkom jeseni se uoči da ona ima malo hrane a dosta legla, a u kasnu jesen da je u njoj i veoma malo pčela.
Kod jako oboljele zajednice dobro je uočljiva potrošnja hrane te da je u njoj uvijek više otvorene hrane. Ovdje se mora razlikovati otvorena a neprerađena i ukisla hrana koju pčele nerado ili apsolutno neće da konzumiraju. U takvim slučajevima popunjenost stanica hranom je jednaka gotovo u cijeloj površini i nema pravilno povećanje od legla (gnijezda) ka poklopljenom mednom vijencu. Stanice bliže mednom poklopljenom vijencu su prazne ili su gotovo prazne kao i stanice do legla (gnijezda). Između legla i zatvorenih mednih vijenaca u stanicama je otvorena hrana svijetle boje (boja bistre suze). Zidovi stanica saća su vlažni, a odaju utisak zamašćenosti.
Kada bolesne pčele uslijed vremenskih prilika duže vrijeme ne mogu izaći iz svog staništa na pročisni let, često defeciraju u svom staništu. Dizenterija je, kao pojava kod oboljelih pčela, učestalija i intenzivnija nego kod zdravih pčela, ako je njen izazivač Nosema apis. Ovakve pojave se obično jave tokom zime. Kada je izazivač nozemoze Nosema ceranae takvih znakova apsolutno i nema. Tragovi sasušenog izmeta (fecesa) se uočavaju u proljeće, obično u neposrednoj blizini zimskog gnijezda, najčešće na satonošama i saću ali i mednim poklopcima. Tragovi se mogu uočiti i u stanicama saća, na bočnim i donjim letvama ramova, na podnoj dasci i na unutrašnjim stijenkama staništa, najčešće prednjoj. Sasušeni tragovi u stanicama saća nalaze se na donjem dijelu stijenke stanice. Na djevičanskom saću lakše ih je uočiti nego na starom saću. Kako jedan broj bolesnih jedinki uslijed naglog uznapredovanja bolesti uopće ne može izaći van staništa pa čak ni ljeti, one se udalje od drugih pčela na nezaposjednuto prazno saće gdje defeciraju sladunjav izmet. Druge radilice – kućne pčele većinu ovog sladunjavog izmeta uzimaju prije nego se on na saću ili stanicama sasuši pa u stanicama ne ostaju dobro uočljivi njegovi tragovi. U tom slučaju na stijenkama praznih stanica ostaju rasute mrvičaste čestice izmeta koje se mogu zapaziti oštrim okom, naročito na djevičanskom ali i starom (tamnom) saću. Pored ovih mrvičastih čestica na gornjem dijelu ruba tih stanica (ćelija) primjećuje se promjena njene boje bilo da se radi o starom ili djevičanskom saću. Ukoliko dizenterija nije izazvana nozemozom, izmet nije sladunjav i pčele ga slabije odstranjuju, odnosno sporije čiste zaprljano saće i ramove. Na osnovu ovih znakova koji se uočavaju zimi i u rano proljeće u pčelarskoj literaturi pogrešno je zaključivano da je nozemoza zimska i proljetna bolest. Tačno je samo da se ona tada lakše uočavala. Pojavom Noseme ceranae, a koja je gotovo i potisnula Nosemu apis, ovih tragova nema pa pčelari tako pogrešno zaključuju da njihove pčele nisu nozemozne.
Uslijed bolesti i odumiranja pčelinjih jedinki razvoj zajednice je usporen. Kada bolest uznapreduje pa svakodnevno umire više stotina pčelinjih jedinki, matica pođe polagati više jaja nego što bolesna zajednica može njegovati. Bolesne radilice i onako slabije njeguju pčelinje leglo. Pored toga, one ne mogu lučiti mliječ pa hrane leglo neadekvatnom hranom uslijed čega i do 15 % jaja i larvi potpuno propada, a preostali dio je slabije uhranjen. Životna ravnoteža pčelinje zajednice sve teže se uspostavlja pa se u pčelinjoj zajednici uočava nesrazmjerno mali broj pčela u odnosu na veličinu prvenstveno otvorenog, a potom i zatvorenog legla. Pčela je više na medu nego na otvorenom leglu. One osjećaju stalnu glad pa uzimaju sve više i više hrane koju ne mogu probaviti te je iznose iz svog staništa prazneći svoje debelo crijevo.
Kada pčelar uoči da je u pčelinjoj zajednici malo pčela sklon je pogrešnim zaključcima kao npr. “velik broj pčela je na paši i sl.” Ipak, krajem jeseni se uoči da u pčelinjoj zajednici ima malo pčela i malo hrane, naročito poklopljene. Pčelar često donese pogrešnu odluku pa ovakvu oboljelu zajednicu dohrani ili, još gore, spoji je sa drugom zdravom zajednicom.
Bolesna zajednica ne može potpuno invertovati nektar, a naročito prihranu – šećerni sirup, pa često i ovako neinvertovanu hranu zatvori voštanim poklopcima. Neinvertovani šećer u procesu provri (prokiseli) povećavajući svoju zapreminu, uslijed čega se ispupče voštani poklopci, a veoma često od 3 – 5 poklopaca se u skupu odvoje od stanica saća. Na ovakvoj prokisloj hrani nema razvoja pčelinje zajednice, a ona pogoduje razvoju spora nosema.
Kada pčele maticu prestanu hraniti matičnom mliječu, ona prestaje polagati jaja, a kada se počne hraniti medom ona se zarazi i na kraju umire. Ona može oboljeti i umrijeti na kraju perioda priprema pčelinjih zajednica za zimu, a češće umire tokom perioda prezimljavanja. Ukoliko je matica oboljela na kraju perioda priprema pčelinjih zajednica za zimu, pčele pokušaju njenu tihu zamjenu. Često matica umre zimi neposredno kada je počela polagati prva jaja ljetnih pčela. Tada pčele započnu izgrdanju prisilnih matičnjaka. Ovi matičnjaci su dugi i tanki, a nalaze se u gornjoj zoni legla.
Jedan broj pčela iz pčelinjeg gnijezda uslijed bolesti padne na podnicu gdje umire. Zimi i u drugim godišnjim dobima poslije višednevnih kiša na podnici se nalazi više mrtvih pčela koje druge pčele, kada počnu općiti s prirodom, iznose iz svog staništa. Zimi prosječno jake a oboljele pčelinje zajednice gube i do 1.500 pčela više nego što izgube zdrave zajednice iste i prosječne veličine.
Znakovi nozemoze izvan staništa
Ujutro, prije izletanja pčela, na letu oboljelih zajednica uočava se jedan broj mrtvih pčela (dvije, tri, pet, pa i znatno više) ovisno od zaraženosti pčelinje zajednice, oblika bolesti, godišnjeg doba i izlazaka pčela u prethodnom danu. Prve izletnice iz staništa iznose mrtve, ali i teško bolesne pčele. Većina bolesnih pčelinjih jedinki izleti iz staništa i umire daleko u prirodi, a jedan broj prizemlji svoj let odmah po izletu, na par koraka od svog staništa. Jedan broj teško bolesnih jedinki i ne izlijeće, nego nogama izlaze iz svog staništa i ubrzanim hodom prelaze poletaljku te ne zadržavajući se na njoj padaju na zemlju. Ovako bolesne jedinke kada padnu na zemlju nastave da se po zemlji kreću žurnim hodom (ne u skokovima), a potom gmižu sve sporije udaljavajući se u pravcu istoka. Ovakvim kretanjima za veoma kratko vrijeme većina jedinki (pčele pješaci) udalji se od svog staništa gdje umiru. Mali broj ovako teško bolesnih pčela iz svog staništa izlazi sporijim hodom zastajkujući neodlučno na kraju poletaljke. Većina tako bolesnih pčela pada sa poletaljke na zemlju i tu ispred staništa i umire, ali jedan broj umire na samoj poletaljci ili se u smrtnim grčevima zadrže na prednjoj strani poletaljke. Poslije dugotrajnih kiša na letu, a naravno i na podnici, nalazi se veći broj mrtvih pčela. Manji broj teško oboljelih radilica, a naročito starijih kućnih pčela, umire u svom staništu nakon čega ih druge pčele iznose van staništa u prirodu. Bolest kod pčelinjih jedinki u zadnjem stadiju razvoja znatno uznapreduje, ali bolesne radilice ljeti, uglavnom smognu snage da izlete iz svog staništa i umru u prirodi. U proljeće često se uočavaju bolesne ili umrle radilice na spoljašnjim stranama plodišta, obično prednjoj. Ljeti pa i u vrijeme hladnijih dana ovakve pojave su rijetke. Na poletnoj dasci i prednjoj vanjskoj strani staništa uočavaju se tragovi pčelinjeg izmeta (fecesa) kojeg su pčele u hodu ili mirovanju izbacile iz svog debelog crijeva. Ljeti su ovakve pojave sasvim rijetke, naročito na prednjoj strani staništa, a u proljeće su česta pojava. Ove pojave na poletnoj dasci kao i na većim pukotinama staništa treba razlikovati od tragova propolisa kojeg “pčele tuđice”, obično u jesen, ugrađuju sa vanjske strane staništa. Različiti su uslovi življenja i aktivnosti pčelinje zajednice tokom jednog dana uslijed čega su i uočavanja umiranja pčelinjih jedinki različita u različito doba dana. Najuočljivija umiranja pčelinjih jedinki su tokom jutra i prvih aktivnijih prijepodnevnih izletanja pčela, a naročito poslije dugotrajnih kiša. Sredinom i u drugoj polovini dana i kod teško oboljelih zajednica teže je uočiti umiranje pčelinjih jedinki. U popodnevnim satima bolesne pčele koje gmižu po zemlji uočavaju se od 20 do 30 metara ispred staništa gdje je i najveći oreol njihovog umiranja. U praksi, pčelar to područje uglavnom ne posmatra. On posmatra zemljište neposredno ispred staništa. Međutim, u popodnevnim satima i kod jako oboljelih zajednica na tom dijelu zemljišta nema bolesnih (živih) pčela. Bolesne pčele za samo dva, tri minuta odgmižu te se udalje više od 5 metara od svog staništa, što je razlog da pčelar tokom dana neposredno ispred staništa i ne zapaža bolesne pčele, a nužda i potreba da pčelinjak mora biti uredan kako bi se ovi znakovi jednostavno uočili. Dakle, trava ispred pčelinjaka mora biti konstantno pokošena. Veći broj mrtvih pčela ispred leta pčelar u ranim jutarnjim satima jednostavno uoči. Sama ta pojava ozbiljan je znak da se radi o bolesti. Međutim, obično ni ova pojava pčelara ne upućuje na bolesno stanje njegove zajednice. Pčelar, ako i druge znakove nije zapazio, o uzroku smrti ovih pčela zaključuje na osnovu pretpostavki. Njegove pretpostavke su najčešće pesimistične pa podcjenjuju moguće opasne uzroke smrti. Obično pčelar posumnja da je smrt pčela nastupila uslijed starosti, odnosno prirodnog umiranja i ubrzane smjene zimskih i ljetnih ili ljetnih i zimskih pčela. Ponekad, kada uoči veliku količinu mrtvih pčela ispred leta on sumnja da je do smrti došlo uslijed grabeži ili zalijetanja tuđih pčela pa da je to samo rezultat njegovih dobrih, jakih i neustrašivih pčela stražarica, te da ih njegove vrijedne radilice angažovane na važnijim poslovima nisu dalje odnijele nego samo ubile i izbacile iz svog staništa. Kada pčelar i zapazi pojedine pčele kako izlaze na leto i padaju sa poletaljke sklon je sumnji da su i to tuđice koje su neslavno završile u njegovoj zajednici. Kada ovakve pojave pčelar učestalije zapaža njegove sumnje postaju ozbiljnije, a najčešće su usmjerene na trovanje pčela i prisustvo varoe. Međutim, tada je kasno da bi pomogao bolesnoj zajednici. Nozemoza je uznapredovala i njoj se vjerovatno već pridružila i neka virusna ili druga bolest. U ovom stadiju bolesti, obično se pojavi i grabež te se zajednica raspada, a bolest prenosi u druge zajednice.
Moguće greške u prepoznavanju nozemoze
Opći znak nozemoze je smanjivanje brojnosti pčelinjih jedinki u pčelinjoj zajednici. Međutim, i zdrava pčelinja zajednica brojno slabi u svojim pojedinim životnim periodima (godišnjim dobima). Naravno da do slabljenja brojnosti pčelinje zajednice može doći i uslijed loših životnih uslova. Bolest se prepoznaje po skupu karakterističnih znakova nozemoze. Neki karakteristični znakovi nozemoze koji se manifestuju na pčeli a i zajednici mogu se zamijeniti sa drugim pčelinjim bolestima, a neki znakovi su im i zajednički. Tako se na osnovu pojedinačnih znakova, nozemoza ne može ni utvrditi, a može zamijeniti sa drugim parazitskim bolestima, uključujući naravno i varozu. Zatim sa nekim virusnim bolestima, a najčešće trovanjima pčela. Manje iskusan pčelar bolest otkrije u njenoj završnoj fazi ili je uopće i ne otkrije.
Potrebno je posebno naglasiti da je većina karakterističnih znakova nozemoze istovremeno i znak za neke druge pčelinje bolesti. Na osnovu skupnih karakterističnih znakova nozemoze ona se može prepoznati ili razlikovati od drugih pčelinjih bolesti. Zajednički znakovi različitih bolesti ne javljaju se u istim odnosno jednakim skupovima i u isto vrijeme. Često pčelar i ne može otkriti karakteristične znakove s obzirom na dobro prikrivenu narav ove bolesti. Pouzdana dijagnoza se utvrđuje mikroskopskom pretragom uzročnika u pčelinjim jedinkama.
Dijagnosticiranje nozemoze
Precizno dijagnosticiranje obavlja se u specijaliziranim laboratorijama, gdje se mikroskopskom pretragom u sadržaju srednjeg crijeva (želuca) ili debelog crijeva (rektuma) pčele ili u njenom izmetu (fecesu) traže spore nosema. Među kvascima, plijesnima i bakterijama, mikroskopom se mogu uočiti različiti mikroorganizmi koji plutaju u vlažnom sadržaju. Njima vlaga pogoduje, a mnogi se hrane neprobavljivom hranom živeći kao komenzali. Među njima mogu se uočiti i jasno razlikovati spore (klice) Nosema apis i Nosema ceranae. Predstadiji spora su kugličastog oblika, veoma su sitni i mogu se uočiti samo elektronskim mikroskopom koji uvećava do 5.000 puta, a u praksi se prilikom dijagnosticiranja nozemoze i ne pretražuju.
U histološkom preparatu srednjeg crijeva bolesne pčele koji je obojen nijansama kombinacija crvene i braon boje tj. prave boje staničnog jezgra, pri povećanju od samo 250 puta mogu se razlikovati spore nosema od staničnih jezgara.
Kada izdrobimo tijelo odrasle bolesne pčele pa u takav preparat dodamo malo vode i jednu kap homogenizatora, pri povećanju za 400 puta jasno se vide ovalne spore nosema na kojima se prelama svjetlost pa se time uočavaju kao vrlo svijetle. Ako prethodni preparat uvećamo za 3.200 puta mogu se naslutiti organeli, odnosno detalji spora nosema. Polušematski, a pomoću elektronskog mikroskopa jasnije se vide detalji spore Noseme apis i Noseme ceranae.
U cilju laboratorijskog dijagnosticiranja na pretragu se šalje 30 do 40 pčela iz svake pčelinje zajednice. Pčele na pretragu treba slati u urednoj suhoj i propustivoj ambalaži zasebno upakovane za svaku pčelinju zajednicu. Nepropustiva ambalaža nije prikladna, jer je takva pogodna za stvaranje plijesni što otežava pretragu. Na svakoj kutiji se upisuje broj zajednice iz koje su uzete pčele. Uzimanje uzoraka slučajnom metodom odabiranja pčela ne predstavlja reprezentativni uzorak zajednice. Takav uzorak ako i da negativan nalaz to nije dokaz da je pčelinja zajednica zdrava. Uzorke treba uzimati od rizičnih grupa, prvenstveno mrtvih pčela. Tokom zime najprije umiru bolesne pčele pa uzorci mrtvih pčela sakupljenih sa podnice u januaru i februaru najsigurniji je materijal za utvrđivanje nozemoze. Ukoliko za uzorke uzimamo žive pčele, onda treba uzimati pčele izletnice na letu jer je bolest mnogostruko zastupljenija kod starijih pčela. Na letu treba uzimati pčele koje izlaze iz staništa, a ne one koje u njega ulaze. Krajem aprila i početkom maja u zajednici je najveća zastupljenost nozemoznih pčela tokom jedne godine, što je značajno ukoliko uzorke uzimamo od živih pčela. Mrtve, ali i žive pčele jedne bolesne zajednice mogu se razdvojiti u skupove pčela koje su sa manjom ili većom vjerovatnoćom oboljele, odnosno umrle uslijed nozemoze. Ovo je veoma bitno prilikom uzimanja i slanja uzoraka na pretragu s obzirom na to da uzimanje i slanje uzoraka može biti iz različitih namjera.
Matica je veoma čest prenosnik Noseme apis i Noseme ceranae. Kod matice se noseme pretražuje u njenom izmetu. Kada samu maticu izdvojimo iz zajednice pa je na čistom staklu poklopimo čašom ona za 2 -3 minuta iz svog debelog crijeva izbaci izmet, što je pouzdan materijal za pretragu.